TMEM2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-407487-LAC

TMEM2 codifica uma hialuronidase transmembranar que contribui para a homeostase da matriz extracelular ao clivar o hialuronano, influenciando assim a composição da matriz pericelular, a adesão celular e a migração. Ao regular a renovação do hialuronano, TMEM2 afeta vias ligadas à morfogênese tecidual, à mecanotransdução e à sinalização inflamatória em microambientes estromais e epiteliais. Alterações no metabolismo do hialuronano e no remodelamento da matriz extracelular estão implicadas em fibrose, interações tumor–estroma e anomalias do desenvolvimento, tornando TMEM2 um alvo relevante para dissecar fenótipos mediados pela matriz. A expressão e a atividade de TMEM2 são, portanto, comumente estudadas em contextos como motilidade celular, ensaios de invasão e respostas de sinalização dependentes da matriz extracelular.

As Partículas de Ativação Lentivirais TMEM2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TMEM2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais TMEM2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TMEM2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de TMEM2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TMEM2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.