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SUZ12双切口酶质粒(m) | sc-424636-NIC | 20 µg | $410.00 |
Suz12 编码 SUZ12,这是多梳抑制复合体 2(PRC2)的关键核心组分之一,与 EZH2/EED 协同作用,催化沉默性组蛋白标记 H3K27me3 的沉积,从而建立可遗传的基因沉默。在小鼠细胞中,SUZ12 通过在双价启动子及其他 Polycomb 靶位点上调控转录抑制,参与调节发育相关基因程序、谱系承诺以及染色质结构。借助 PRC2 依赖的表观遗传调控,SUZ12 影响干细胞自我更新、分化与细胞周期控制等过程;其功能受扰会导致转录状态失衡,与癌症生物学及发育表型相关。正因如此,Suz12 常被用作研究染色质介导的抑制、增强子—启动子调控以及情境特异性基因表达网络的重要节点。
SUZ12 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Suz12 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Suz12内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Suz12的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Suz12基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。