SURF-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423223

Visão geral

Surf6 codifica a SURF-6, uma proteína nucleolar conservada implicada na biogênese de ribossomos e na homeostase nucleolar, por meio de funções no processamento de pré-rRNA e na maturação das subunidades ribossômicas. A SURF-6 participa de processos de ligação a RNA e de organização do nucléolo que coordenam a capacidade de síntese proteica com programas de crescimento e proliferação celular. A disrupção da função nucleolar e da produção de ribossomos está intimamente ligada a respostas de estresse celular, tradução alterada e defeitos de proliferação, tornando Surf6 relevante para estudos de estabilidade genômica e controle do crescimento em sistemas de mamíferos. Em modelos murinos, a perturbação de Surf6 oferece um ponto de entrada manejável para investigar como a biogênese ribossômica se cruza com fenótipos do desenvolvimento e com a desregulação, associada a doenças, de vias nucleolares.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO SURF-6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Surf6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Surf6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Surf6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína SURF-6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Surf6 para a investigação da sinalização de SURF-6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Surf6 críticos para a função SURF-6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Surf6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo SURF-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo SURF-6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Surf6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo SURF-6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR SURF-6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Surf6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Surf6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.