Superoxide Dismutase 2/SOD2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400230-LAC

SOD2 codifica a superóxido dismutase mitocondrial dependente de manganês, que converte o ânion superóxido em peróxido de hidrogênio, constituindo um mecanismo central de defesa antioxidante na matriz mitocondrial. Ao limitar as espécies reativas de oxigênio (ERO) mitocondriais, a SOD2 influencia a homeostase redox, a respiração mitocondrial e vias de sinalização a jusante ligadas a respostas ao estresse oxidativo, incluindo programas regulados por NRF2 e redes transcricionais associadas à inflamação. Alterações na atividade da SOD2 têm sido implicadas em mecanismos subjacentes à neurodegeneração, à disfunção cardiometabólica e à biologia do câncer, nas quais o dano oxidativo e a disfunção mitocondrial moldam decisões sobre o destino celular. Como guardiã das ERO mitocondriais, a SOD2 é amplamente estudada pelo seu impacto na suscetibilidade à apoptose, na senescência e na reprogramação metabólica em células sob estresse ou transformadas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Superoxide Dismutase 2/SOD2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de SOD2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Superoxide Dismutase 2/SOD2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição SOD2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Superoxide Dismutase 2/SOD2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo SOD2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.