Superoxide Dismutase 1/SOD1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400186-LAC

A SOD1 humana codifica a superóxido dismutase citosólica Cu/Zn, uma enzima antioxidante fundamental que catalisa a conversão de radicais superóxido em peróxido de hidrogênio e oxigênio molecular, preservando a homeostase redox. Ao limitar o acúmulo de espécies reativas de oxigênio, a SOD1 influencia a função mitocondrial, a proteostase e vias de sinalização de resposta ao estresse, como programas antioxidantes regulados por NRF2 e a sinalização inflamatória sensível ao estado redox. Alterações na atividade da SOD1 ou seu mau dobramento estão associadas a dano oxidativo e vulnerabilidade neuronal, com relevância bem estabelecida para a esclerose lateral amiotrófica (ELA) e modelos mais amplos de neurodegeneração. A SOD1 também é amplamente estudada em câncer, lesão por isquemia-reperfusão e contextos de estresse metabólico, nos quais as espécies reativas de oxigênio moldam a sobrevivência, a diferenciação e a sinalização celular.

As Partículas de Ativação Lentivirais Superoxide Dismutase 1/SOD1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de SOD1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Superoxide Dismutase 1/SOD1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição SOD1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Superoxide Dismutase 1/SOD1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo SOD1 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.