Stra6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405364

Visão geral

STRA6 codifica a Stra6, um recetor de membrana multipasso que medeia a captação celular de vitamina A ao ligar-se, à superfície celular, a complexos de retinol com a proteína ligadora de retinol (RBP). Ao controlar a disponibilidade intracelular de retinoides, a Stra6 influencia a sinalização do ácido retinoico e programas transcricionais a jusante que regulam a diferenciação, a homeostase epitelial e o padrão de desenvolvimento. A atividade de STRA6 cruza-se com redes de metabolismo de retinoides que envolvem LRAT, enzimas RDH/ALDH e recetores nucleares de ácido retinoico, moldando assim decisões de destino celular e a integridade dos tecidos. A desregulação ou variação genética em STRA6 tem sido associada a anomalias do desenvolvimento e fenótipos relacionados com a visão, consistentes com perturbações no transporte e na sinalização de retinoides.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Stra6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STRA6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STRA6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STRA6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Stra6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STRA6 para a investigação da sinalização de Stra6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STRA6 críticos para a função Stra6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STRA6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Stra6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Stra6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STRA6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Stra6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Stra6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STRA6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STRA6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.