Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
RPA40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404594
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RPA40 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico RPA40, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:RPA40 Anticorpo (H-6): sc-374443
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RPA40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404594 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
POLR1C codifica a RPA40, uma subunidade compartilhada das RNA polimerases I e III que dá suporte à montagem e à estabilidade desses complexos de transcrição. Por meio de suas funções na síntese de rRNA pela Pol I e na transcrição de tRNAs e outros pequenos RNAs não codificantes pela Pol III, a RPA40 contribui para a biogênese de ribossomos, a proteostase e o controle do crescimento celular. A perturbação do output transcricional ligado a POLR1C pode alterar a função nucleolar e as respostas celulares ao estresse, conectando esse fator a vias que influenciam proliferação e diferenciação. Variantes em POLR1C têm sido associadas a doenças hereditárias que afetam a mielina e o desenvolvimento craniofacial, ressaltando a importância da integridade das Pol I/III na biologia humana.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RPA40 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene POLR1C em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do POLR1C, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do POLR1C na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RPA40.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de POLR1C para a investigação da sinalização de RPA40, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) POLR1C críticos para a função RPA40
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos POLR1C para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo RPA40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RPA40 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus POLR1C. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo RPA40 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RPA40 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia POLR1C para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo POLR1C definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.