RP58 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407058

Visão geral

ZBTB18 codifica o represssor transcricional RP58, que contém dedos de zinco e um domínio BTB, atuando como regulador nuclear que modula programas de expressão gênica que governam o desenvolvimento neural, a especificação do destino celular e a diferenciação. O RP58 contribui para o controle transcricional associado à cromatina ao recrutar maquinarias de correpressores e ao moldar redes transcricionais específicas de linhagem que influenciam a proliferação e a maturação. Em células humanas, alterações na atividade de ZBTB18/RP58 têm sido associadas a processos neurodesenvolvimentais desregulados e a estados transcricionais aberrantes observados em contextos de doença, tornando-o relevante para estudos da arquitetura regulatória gênica. Seus efeitos a jusante se cruzam com vias que controlam a maturação neuronal, a dinâmica do ciclo celular e a programação epigenética.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO RP58 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ZBTB18 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ZBTB18, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ZBTB18 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína RP58.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ZBTB18 para a investigação da sinalização de RP58, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ZBTB18 críticos para a função RP58
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ZBTB18 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo RP58 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo RP58 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ZBTB18. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo RP58 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR RP58 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ZBTB18 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ZBTB18 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.