RNF182 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-415138-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- RNF182O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase RNF182 (h) e o Plasmídeo Double Nickase RNF182 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para RNF182. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
RNF182 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-415138-NIC | 20 µg | $410.00 |
RNF182 codifica uma ligase E3 de ubiquitina do tipo dedo RING, que catalisa a transferência de ubiquitina para substratos proteicos específicos, controlando assim a estabilidade das proteínas e a amplitude de sinalização no sistema ubiquitina–proteassoma. Por meio da regulação, dependente de ubiquitinação, de efetores intracelulares, a RNF182 está associada a vias que governam respostas ao estresse celular, controle de qualidade proteica e a renovação de proteínas associadas à membrana e de proteínas de sinalização. Alterações na expressão de RNF182 foram relatadas em estudos de biologia do sistema nervoso e neuroinflamação, em linha com funções na homeostase neuronal e na proteostase regulada. Essas características tornam a RNF182 um alvo útil para investigar como ligases de ubiquitina moldam redes de sinalização e transições de estado celular em modelos de células humanas.
RNF182 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus RNF182 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de RNF182. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função RNF182. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com RNF182 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.