PTRF CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-404669

개요

CAVIN1은 폴리머레이스 I 및 전사 방출 인자(PTRF/cavin-1)를 암호화하며, 이는 카베올린과 협력해 플라스크 모양의 세포막 함입 구조인 카베올라(caveolae)를 안정화하는 핵심 구조 성분입니다. PTRF는 카베올라의 생성과 동역학을 지지하여 지질 항상성, 엔도사이토시스, 기계적 보호(mechanoprotection)에 기여하고, 세포 표면에서 조직되는 신호전달 경로에도 영향을 미칩니다. 막 조직화와 수송에서의 역할을 통해 PTRF는 수용체의 가용성과 기계적·대사적 자극에 대한 하위 신호 반응을 조절할 수 있습니다. CAVIN1/PTRF의 조절 이상은 근육 및 지방 조직 생물학에서 카베올라 기능 변화와 연관되어 왔으며, 지방이영양증 관련 표현형 및 종양 세포 거동 등 다양한 맥락에서 연구되어 왔습니다.

PTRF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 CAVIN1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 CAVIN1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 CAVIN1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 PTRF 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 PTRF 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 CAVIN1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• PTRF 기능에 중요한 CAVIN1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 CAVIN1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• PTRF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 PTRF CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 CAVIN1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  PTRF HDR 플라스미드 (h) 및 PTRF HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 CAVIN1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 CAVIN1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.