PRKCDBP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407370

Descripción general

PRKCDBP (proteína de unión a la proteína quinasa C delta) es un adaptador citosólico implicado en la señalización asociada a PKCδ, donde influye en vías dependientes de la fosforilación que regulan la progresión del ciclo celular, la apoptosis y las respuestas al estrés. Esta proteína se ha relacionado con la modulación de programas transcripcionales y el control de puntos de control (checkpoints), integrando señales aguas arriba procedentes de cascadas de quinasas que determinan decisiones celulares de crecimiento y supervivencia. Se han descrito alteraciones en la expresión de PRKCDBP en múltiples contextos tumorales, lo que respalda su estudio en mecanismos de control de la proliferación, respuestas al daño del ADN y redes asociadas a supresores tumorales. Estas propiedades convierten a PRKCDBP en un objetivo relevante para desentrañar dependencias de señalización y fenotipos específicos del contexto en modelos de células humanas.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO PRKCDBP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen PRKCDBP en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del PRKCDBP junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de PRKCDBP tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína PRKCDBP.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en PRKCDBP para la investigación de la señalización de PRKCDBP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de PRKCDBP críticos para la función de PRKCDBP
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de PRKCDBP para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido PRKCDBP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido PRKCDBP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus PRKCDBP. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR PRKCDBP (h) y el plásmido HDR PRKCDBP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología PRKCDBP para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana PRKCDBP definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.