PIWIL2 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402211-LAC

PIWIL2 codifica uma proteína Argonaute da família PIWI que se liga a piRNAs para regular o silenciamento gênico guiado por pequenos RNAs, apoiando a repressão de transposons, a estabilidade do genoma e o controle epigenético da transcrição. Em células humanas, PIWIL2 está associado ao processamento de RNA, à regulação ligada à cromatina e à manutenção de programas relacionados à linhagem germinativa, com papéis emergentes em estados do tipo célula-tronco e na diferenciação celular. A expressão desregulada de PIWIL2 tem sido relatada em múltiplos contextos tumorais e é frequentemente estudada em relação à proliferação, invasão e alterações na sinalização de destino celular. Como resultado, PIWIL2 é um alvo útil para investigar a biologia da via de piRNA, a regulação por RNAs não codificantes e mecanismos que conectam a vigilância genômica a fenótipos oncogênicos.

As Partículas de Ativação Lentivirais PIWIL2 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de PIWIL2 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais PIWIL2 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição PIWIL2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de PIWIL2. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo PIWIL2 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.