Plasmide CRISPR/Cas9 KO periaxin (h): sc-404868
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- periaxin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique periaxin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: periaxin Antibody (G-5): sc-515672
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO periaxin (h) | sc-404868 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
PRX code la périamine, une protéine d’échafaudage enrichie dans les cellules de Schwann, essentielle à la stabilité et au maintien de la myéline des nerfs périphériques. La périamine participe à l’organisation du cytosquelette et à l’architecture des domaines membranaires, en favorisant l’allongement des cellules de Schwann et la formation de complexes associés à la myéline qui régissent les interactions axone–glie. La perturbation de PRX altère l’homéostasie de la myéline et la conduction nerveuse, ce qui relie une fonction anormale de la périamine à des neuropathies périphériques héréditaires, notamment la maladie de Charcot–Marie–Tooth de type 4F et des phénotypes de type Dejerine–Sottas. Par conséquent, PRX est largement étudié dans les voies qui contrôlent la myélinisation, la différenciation des cellules de Schwann et les réponses au stress influençant l’intégrité des nerfs périphériques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO periaxin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène PRX dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du PRX, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert PRX à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine periaxin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en PRX pour l'étude de la signalisation de periaxin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de PRX essentiels à la fonction de periaxin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de PRX pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le periaxin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le periaxin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus PRX. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le periaxin plasmide HDR (h) et le periaxin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie PRX pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles PRX définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.