PDGF-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r): sc-437277
- alvos específicos: rat
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PDGF-B O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (r) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PDGF-B, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:PDGF-B Anticorpo (C-5): sc-74494
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PDGF-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) | sc-437277 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
PDGF-B codifica a subunidade B do fator de crescimento derivado de plaquetas, um fator de crescimento secretado que forma homo- ou heterodímeros para ativar a sinalização do PDGFR e as vias downstream PI3K–AKT e RAS–MAPK. Em células de rato, o PDGF-B regula a proliferação e a migração de células mesenquimais, o recrutamento de pericitos e a maturação vascular, influenciando a remodelação da matriz extracelular e a homeostase tecidual. A sinalização impulsionada por PDGF-B interage com o reparo de feridas e respostas fibroproliferativas, e sua desregulação está ligada à angiogênese patológica e à ativação estromal aberrante, relevantes para a biologia cardiovascular e renal. Como o PDGF-B modula a comunicação parácrina entre compartimentos endoteliais, murais e estromais, ele é amplamente estudado em modelos de remodelação associada à inflamação e à dinâmica do microambiente tumoral.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PDGF-B (r) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene em linhas celulares rat. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do , juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PDGF-B.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de para a investigação da sinalização de PDGF-B, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) críticos para a função PDGF-B
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PDGF-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r) e pelo PDGF-B Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (r2) têm como alvo locais distintos dentro do locus . Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PDGF-B Plasmídeo HDR (r) e o Plasmídeo HDR PDGF-B (r2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.