Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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PAO Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-432791
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- PAO O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico PAO, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
PAO Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-432791 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O Smox de camundongo codifica a poliamina oxidase (PAO), uma enzima dependente de flavina que catalisa a retroconversão de poliaminas, contribuindo para a homeostase de espermina e espermidina e regulando o fluxo intracelular de poliaminas. A atividade da PAO conecta o metabolismo de poliaminas ao equilíbrio redox celular por meio da produção de peróxido de hidrogênio e aldeídos reativos, influenciando respostas ao estresse oxidativo, a função mitocondrial e a sinalização inflamatória. Alterações na regulação de SMOX/PAO têm sido associadas à proliferação desregulada, à maior suscetibilidade a danos no DNA e a contextos de lesão tecidual em que o turnover de poliaminas e a sinalização por ROS se cruzam, incluindo a biologia do câncer e modelos de neuroinflamação. Como nó metabólico, a PAO oferece um ponto de entrada mecanístico para estudar como o catabolismo de poliaminas modula decisões de destino celular e vias adaptativas ao estresse.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO PAO (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Smox em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Smox, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Smox na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína PAO.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Smox para a investigação da sinalização de PAO, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Smox críticos para a função PAO
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Smox para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo PAO Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo PAO Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Smox. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo PAO Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR PAO (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Smox para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Smox definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.