P5CRL CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-406033

개요

PYCRL은 프롤린 및 관련 아미노산의 산화환원 대사에 관여하는 NAD(P)H 의존성 환원효소 계열의 일원인 피롤린-5-카복실레이트 환원효소 유사 단백질(P5CRL)을 암호화합니다. 프롤린의 생합성과 분해(회전)는 세포 내 산화환원 균형, NADP(H) 항상성, 그리고 미토콘드리아 연관 대사 적응에 영향을 미치며, 그 결과 PYCRL은 산화 스트레스 반응 및 생합성 플럭스 조절과 같은 더 넓은 과정들과 연결됩니다. 프롤린 경로 효소의 교란은 증식, 콜라겐 관련 수요를 통한 세포외기질 리모델링, 그리고 영양 스트레스 내성에 영향을 줄 수 있습니다. 따라서 PYCRL은 암 생물학과 유전성 대사 이상을 포함해 산화환원 및 아미노산 대사가 변화된 질병 관련 맥락에서 대사 재배선을 연구하는 데 관심 대상이 됩니다.

P5CRL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PYCRL 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PYCRL 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PYCRL의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 P5CRL 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 P5CRL 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PYCRL 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• P5CRL 기능에 중요한 PYCRL 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PYCRL 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• P5CRL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 P5CRL CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PYCRL 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  P5CRL HDR 플라스미드 (h) 및 P5CRL HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PYCRL 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PYCRL 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.