Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
P2X4 Antibody (D-3): sc-518167. Western blot analysis of P2X4 expression in HeLa (A), T-47D (B), MCF7 (C) and Neuro-2A (D) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgGκ BP-HRP: sc-516102.
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P2X4双切口酶质粒(h): sc-401779-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- P2X4 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- P2X4双切酶质粒（h）和P2X4双切酶质粒（h2）编码针对P2RX4的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：P2X4: sc-518167，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
P2X4双切口酶质粒(h) | sc-401779-NIC | 20 µg | $410.00 |
P2RX4 编码人类 P2X4 受体，这是一种由 ATP 门控的非选择性阳离子通道，可在细胞外核苷酸刺激下介导快速的 Ca²⁺ 和 Na⁺ 内流。P2X4 信号参与嘌呤能神经传递、小胶质细胞激活以及炎症性串扰，并与调控细胞因子释放、趋化和细胞兴奋性的通路相整合。在免疫与神经系统相关背景中，P2X4 活性与神经炎症和神经病理性疼痛的机制有关，也被用于研究其与血管及代谢应激反应的关联。作为一种对损伤相关 ATP 作出响应的膜离子通道，P2X4 是研究 ATP 驱动信号以及离子通量依赖的转录程序的一个有用节点。
P2X4 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 P2RX4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对P2RX4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏P2RX4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了P2RX4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。