NKp44 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407295

개요

NCR2는 NK 세포 활성화 시 유도되며 ITAM을 가진 어댑터 단백질 TYROBP(DAP12)와의 결합을 통해 신호를 전달하는 활성화 수용체인 NKp44(CD336)을 암호화합니다. NKp44가 세포성 또는 병원체 연관 리간드와 결합하면 NK 세포의 탈과립과 사이토카인 분비가 촉진되며, 이는 세포독성 반응을 형성하는 선천면역 감시 경로에 통합됩니다. NCR2 발현과 NKp44 매개 신호전달은 염증성 미세환경, 암 및 만성 감염 환경에서의 NK 세포 기능 변화 등 면역 조절 이상과 관련된 맥락에서 연구되어 왔습니다. 또한 NKp44는 유도성으로 발현되는 표면 수용체이므로, NK 세포의 활성화 상태와 다른 NK 수용체들과의 수용체 간 상호작용(cross-talk)을 분석하는 데에도 활용됩니다.

NKp44 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 NCR2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 NCR2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 NCR2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 NKp44 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 NKp44 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 NCR2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• NKp44 기능에 중요한 NCR2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 NCR2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• NKp44 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 NKp44 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 NCR2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  NKp44 HDR 플라스미드 (h) 및 NKp44 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 NCR2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 NCR2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.