NDST1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404078-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- NDST1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase NDST1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase NDST1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para NDST1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:NDST1 Anticorpo (FF-2): sc-100790
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
NDST1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404078-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
NDST1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404078-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
NDST1 (N-desacetilase/N-sulfotransferase 1) é uma enzima-chave residente no Golgi que catalisa as etapas de N-desacetilação e N-sulfatação durante a biossíntese de sulfato de heparano, moldando os padrões de sulfatação que determinam as interações entre glicosaminoglicanos e proteínas. Ao controlar a estrutura de domínios do sulfato de heparano, a NDST1 modula a organização da matriz extracelular e a disponibilidade de ligantes para vias como as de sinalização FGF, WNT, BMP e Hedgehog, influenciando a adesão e a migração celular, bem como a formação de gradientes de morfógenos. Alterações na atividade da NDST1 e na sulfatação do sulfato de heparano têm sido associadas a programas de desenvolvimento desregulados e à remodelação, relacionada a doenças, da sinalização célula–matriz. Como resultado, a NDST1 é amplamente estudada por seu papel na regulação, mediada por proteoglicanos, da sinalização por fatores de crescimento e da homeostase tecidual.
NDST1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus NDST1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de NDST1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função NDST1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com NDST1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.