MMP-20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405838

Visão geral

MMP20 codifica a metaloproteinase de matriz 20 (MMP-20, enamelysin), uma endopeptidase dependente de zinco especializada na remodelação da matriz extracelular, com atividade marcante durante a formação do esmalte. Ao clivar proteínas estruturais da matriz e processar componentes da MEC, a MMP-20 contribui para uma proteólise regulada que coordena a maturação tecidual e os processos de mineralização. Sua atividade se integra a vias mais amplas reguladas por metaloproteinases que moldam as interações célula–matriz, cascatas de ativação de proteases e a dinâmica de sinalização extracelular. A desregulação da função de MMP20 está associada a defeitos no desenvolvimento do esmalte e tem sido investigada no contexto de alterações do microambiente tecidual impulsionadas por proteólise, relevantes para a biologia de doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO MMP-20 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene MMP20 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do MMP20, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do MMP20 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína MMP-20.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de MMP20 para a investigação da sinalização de MMP-20, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) MMP20 críticos para a função MMP-20
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos MMP20 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo MMP-20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo MMP-20 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus MMP20. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo MMP-20 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR MMP-20 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia MMP20 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo MMP20 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.