MMP-13 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421670-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- MMP-13O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase MMP-13 (m) e o Plasmídeo Double Nickase MMP-13 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Mmp13. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
MMP-13 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421670-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MMP-13 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421670-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A metaloproteinase de matriz-13 (MMP-13), codificada pelo gene murino *Mmp13*, é uma endopeptidase secretada dependente de zinco que cliva preferencialmente colagênios fibrilares e outros substratos da matriz extracelular (MEC) para regular a remodelação tecidual. Sua expressão é induzida por citocinas inflamatórias e pela sinalização de fatores de crescimento e se integra a programas transcricionais ligados a MAPK/AP-1 e NF-κB, que coordenam a renovação da MEC e a proteólise pericelular. A atividade da MMP-13 contribui para a dinâmica da matriz de cartilagem e osso, o acoplamento entre osteoclastos e osteoblastos e processos de reparo de feridas, por meio da modulação da degradação de colágeno e de sinais subsequentes derivados da matriz. A desregulação de *Mmp13* é frequentemente estudada na degeneração musculoesquelética, na remodelação tecidual inflamatória e nas interações tumor–estroma, nas quais alterações na composição da MEC influenciam a migração e a invasão celular.
MMP-13 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Mmp13 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Mmp13. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Mmp13. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Mmp13 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.