MIZIP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-426433
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- MIZIP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico MIZIP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MIZIP Anticuerpo (E-4): sc-398514
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
MIZIP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-426433 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Zmynd19 codifica MIZIP, una proteína asociada a dedos de zinc que interactúa con MYC y que se ha implicado en la regulación de programas transcripcionales vinculados al crecimiento y la diferenciación celular. A través de su asociación con MYC y con supuestos complejos proteicos mediados por dedos de zinc, se cree que MIZIP influye en redes de expresión génica que coordinan la proliferación, el metabolismo celular y la especificación de linaje. La alteración del control transcripcional centrado en MYC es ampliamente relevante para fenotipos oncogénicos y del desarrollo, lo que convierte a Zmynd19 en un nodo útil para desentrañar la regulación transcripcional dependiente del contexto. En sistemas de ratón, la perturbación de MIZIP puede ayudar a aclarar cómo los correguladores moldean las vías impulsadas por MYC y los estados celulares posteriores.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO MIZIP (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Zmynd19 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Zmynd19 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Zmynd19 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína MIZIP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Zmynd19 para la investigación de la señalización de MIZIP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Zmynd19 críticos para la función de MIZIP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Zmynd19 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido MIZIP CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido MIZIP CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Zmynd19. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR MIZIP (m) y el plásmido HDR MIZIP (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Zmynd19 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Zmynd19 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.