mAChR M5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402943-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- mAChR M5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase mAChR M5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase mAChR M5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHRM5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
mAChR M5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402943-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
mAChR M5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402943-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHRM5 codifica o receptor muscarínico humano de acetilcolina M5 (mAChR M5), um receptor acoplado à proteína G que se envolve principalmente na sinalização Gq/11 para estimular a fosfolipase C, a produção de trifosfato de inositol/diacilglicerol, a mobilização de Ca²⁺ intracelular e a atividade subsequente das vias de PKC e MAPK. Por meio dessas cascatas, o M5 pode modular a excitabilidade neuronal, a sinalização sináptica e as respostas neurovasculares, além de influenciar processos secretórios e do músculo liso de maneira dependente do tipo celular. A expressão de CHRM5 e a dinâmica da sinalização colinérgica são frequentemente investigadas no contexto da regulação de circuitos dopaminérgicos, da neuroinflamação e de fenótipos comportamentais relevantes para o uso de substâncias e outras áreas de pesquisa neuropsiquiátrica.
mAChR M5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHRM5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHRM5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHRM5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHRM5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.