LTK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421486
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LTK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LTK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:LTK Anticorpo (B-6): sc-393465
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LTK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421486 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene **Ltk** de camundongo codifica a tirosina quinase de leucócitos (LTK), uma tirosina quinase receptora que regula a transdução de sinais que controlam o crescimento, a sobrevivência e a diferenciação celular. A autofosforilação de LTK pode acionar cascatas de quinases a jusante, incluindo as vias de sinalização associadas a MAPK/ERK e PI3K/AKT, influenciando a proliferação celular e programas de resposta ao estresse. Em contextos do sistema imune e do sistema nervoso, LTK tem sido associada à especificação de linhagem e à maturação funcional, tornando-a relevante para estudar a comunicação cruzada (crosstalk) entre redes de tirosina quinases receptoras e a sinalização do desenvolvimento. A desregulação da sinalização de RTKs, incluindo alterações na atividade de LTK, é frequentemente investigada em modelos de proliferação aberrante e transformação, o que sustenta seu uso em estudos mecanísticos de circuitos de sinalização associados a doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LTK (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ltk em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ltk, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ltk na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LTK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ltk para a investigação da sinalização de LTK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ltk críticos para a função LTK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ltk para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LTK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo LTK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ltk. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LTK Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR LTK (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ltk para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ltk definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.