Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LRP5 Plasmide Double Nickase (m): sc-421465-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LRP5 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LRP5 Double Nickase Plasmid (m) e il LRP5 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Lrp5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: LRP5 Antibody (B-9): sc-390267
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LRP5 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421465-NIC | 20 µg | $410.00 |
Lrp5 codifica la low-density lipoprotein receptor–related protein 5 (LRP5), un co-recettore a singolo passaggio di membrana che potenzia la segnalazione canonica Wnt/β-catenina formando complessi indotti dal ligando con i recettori Frizzled. Nei tessuti murini, LRP5 contribuisce all’attività degli osteoblasti, alla regolazione della massa ossea e all’omeostasi metabolica, e può influenzare i programmi di proliferazione e differenziamento cellulare tramite la trascrizione dipendente dalla β-catenina. LRP5 interagisce inoltre con modulatori extracellulari come DKK e sclerostina e coordina l’output della via durante lo sviluppo e il rimodellamento dei tessuti. La deregolazione della segnalazione di Lrp5 è ampiamente utilizzata per modellare meccanismi rilevanti per i fenotipi scheletrici e per i cambiamenti della fisiologia tissutale guidati da Wnt.
LRP5 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Lrp5 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Lrp5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Lrp5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Lrp5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.