LOC100653515 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418910
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- LOC100653515 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico LOC100653515, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
LOC100653515 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-418910 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CEP295NL (LOC100653515) é um gene humano anotado como um locus do tipo CEP295 e espera-se que esteja relacionado à biologia associada ao centrossomo com base na homologia com membros da família CEP295 implicados na biogênese de centríolos e na maturação do centrossomo. Proteínas nesse espaço funcional contribuem para a organização de microtúbulos, a montagem do fuso e a segregação fiel de cromossomos durante a mitose, influenciando assim a progressão do ciclo celular e a estabilidade do genoma. A desregulação da estrutura do centrossomo ou do seu número de cópias é frequentemente associada à aneuploidia e a fenótipos de estresse celular, fornecendo uma justificativa para estudar o CEP295NL em contextos proliferativos. A caracterização do LOC100653515 pode ajudar a esclarecer como processos ligados ao centrossomo se integram a checkpoints e a vias de remodelamento do citoesqueleto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO LOC100653515 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CEP295NL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CEP295NL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CEP295NL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína LOC100653515.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CEP295NL para a investigação da sinalização de LOC100653515, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CEP295NL críticos para a função LOC100653515
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CEP295NL para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo LOC100653515 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo LOC100653515 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CEP295NL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo LOC100653515 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR LOC100653515 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CEP295NL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CEP295NL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.