Klotho Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400970-LAC

O gene humano **KL** codifica a **Klotho**, uma proteína de membrana tipo I de passagem única que também existe como um ectodomínio solúvel, atuando como um modulador-chave da sinalização do fator de crescimento de fibroblastos e do metabolismo mineral sistêmico. Como co-receptor obrigatório do **FGF23**, a Klotho influencia a homeostase de fosfato e vitamina D e molda os outputs a jusante das vias **MAPK/ERK** e **PI3K/AKT** em tecidos responsivos. Além disso, a Klotho tem sido associada à regulação de respostas ao estresse oxidativo, à sinalização **Wnt** e a programas de senescência celular que afetam o remodelamento tecidual e a homeostase metabólica. Alterações na expressão de **KL** foram relacionadas a fenótipos relevantes para disfunção renal, calcificação vascular e processos cardiometabólicos e neurodegenerativos associados ao envelhecimento, sustentando seu uso como um nó mecanístico em modelos de pesquisa focados em vias.

As Partículas de Ativação Lentivirais Klotho (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de KL numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Klotho (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição KL, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Klotho. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo KL e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.