KCTD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-409961

Visão geral

KCTD5 codifica uma proteína contendo um domínio de tetramerização de canal de potássio, que atua como adaptadora na homeostase proteica dependente de ubiquitina, geralmente em conjunto com complexos de ligase E3 baseados em CUL3 para influenciar a ubiquitinação e a degradação de substratos. Por meio dessas interações, a KCTD5 pode afetar a dinâmica de redes de sinalização e a proteostase celular, incluindo processos ligados à função neuronal e a vias responsivas ao estresse. A regulação alterada de adaptadores da família KCTD tem sido associada à degradação proteica desregulada e a saídas de sinalização perturbadas, características recorrentes na biologia do câncer e em distúrbios neurobiológicos. Consequentemente, a KCTD5 é estudada como um nó modulador que conecta a maquinaria de ubiquitinação ao controle de vias e ao fenótipo celular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KCTD5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCTD5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCTD5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCTD5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KCTD5.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCTD5 para a investigação da sinalização de KCTD5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCTD5 críticos para a função KCTD5
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCTD5 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KCTD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KCTD5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCTD5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KCTD5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KCTD5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCTD5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCTD5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.