Integrin αM/CD11b Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400563-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Integrin αM/CD11bO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Integrin αM/CD11b (h) e o Plasmídeo Double Nickase Integrin αM/CD11b (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ITGAM. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Integrin αM/CD11b Anticorpo (2LPM19c): sc-20050
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Integrin αM/CD11b Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400563-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin αM/CD11b Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400563-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ITGAM humano codifica a integrina αM (CD11b), que heterodimeriza com a ITGB2 para formar o Mac-1/CR3, um receptor de adesão leucocitária e de complemento central para a função imune inata. O CD11b medeia a adesão firme e a migração transendotelial por meio de interações com ICAM, sustenta a fagocitose de alvos opsonizados por iC3b e contribui para a sinalização outside-in que molda a remodelação de actina e programas de genes inflamatórios. Essas atividades se articulam com a sinalização de integrinas, o cross-talk com receptores Fc e o tráfego guiado por quimiocinas em células mieloides como neutrófilos, monócitos, macrófagos e determinados subtipos de células dendríticas. A adesão e a sinalização efetora dependentes de CD11b, quando desreguladas, são frequentemente investigadas em inflamação e autoimunidade, na patogênese de doenças infecciosas e no comportamento de células mieloides em microambientes imunes associados a tumores.
Integrin αM/CD11b O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ITGAM em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ITGAM. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ITGAM. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ITGAM interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.