Integrin α1/ITGA1/CD49a Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401275

Panoramica

ITGA1 codifica l’integrina α1 (CD49a), che eterodimerizza con l’integrina β1 formando un recettore che lega collagene e laminina e che media l’adesione cellula–matrice extracellulare e la meccanotrasduzione. Attraverso l’assemblaggio delle adesioni focali e la segnalazione via le vie FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, l’integrina α1 influenza, in modo dipendente dal contesto, l’organizzazione del citoscheletro, la migrazione, la proliferazione e la sopravvivenza. L’attività di ITGA1 contribuisce alla regolazione del rimodellamento tissutale e del posizionamento delle cellule infiammatorie, modellando le dinamiche di adesione e le successive risposte trascrizionali. Un’alterata segnalazione integrina α1/β1 è stata associata a interazioni cellula–matrice deregolate osservate nella fibrosi, nel crosstalk tumore–stroma e nel rimodellamento del microambiente immunitario, rendendola un bersaglio utile per studi mirati sulle vie di segnalazione.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Integrin α1/ITGA1/CD49a (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ITGA1 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ITGA1 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ITGA1 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Integrin α1/ITGA1/CD49a.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ITGA1 per lo studio della segnalazione di Integrin α1/ITGA1/CD49a, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ITGA1 critici per la funzione di Integrin α1/ITGA1/CD49a
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ITGA1 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal Integrin α1/ITGA1/CD49a CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ITGA1. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Integrin α1/ITGA1/CD49a Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR Integrin α1/ITGA1/CD49a (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ITGA1 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ITGA1 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.