IL-20Rβ Plasmide KO CRISPR/Cas9 (r): sc-437368

Panoramica

IL-20Rβ (subunità beta del recettore dell’interleuchina-20) è una catena recettoriale di citochine di tipo II che si associa a IL-20Rα o a IL-22R1 per formare complessi recettoriali funzionali per IL-19, IL-20 e IL-24. Il legame del ligando attiva la segnalazione JAK/STAT, in particolare programmi trascrizionali dipendenti da STAT3 che regolano la differenziazione epiteliale, la funzione di barriera e l’espressione di mediatori infiammatori. Nei tessuti di ratto, la segnalazione mediata da IL-20Rβ è implicata nel crosstalk tra cellule immunitarie e cellule parenchimali durante il rimodellamento tissutale e le risposte infiammatorie. La disregolazione di questo asse è spesso studiata in contesti quali l’infiammazione cutanea e delle mucose, le vie associate alla fibrosi e i cambiamenti nella proliferazione e sopravvivenza cellulare guidati dalle citochine.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-20Rβ (r) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene in linee cellulari rat. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-20Rβ.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di per lo studio della segnalazione di IL-20Rβ, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni critici per la funzione di IL-20Rβ
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-20Rβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r) e dal IL-20Rβ CRISPR/Cas9 KO Plasmid (r2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus . Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-20Rβ Plasmide HDR (r) e il plasmide HDR IL-20Rβ (r2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.