IL-20Rα Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405034

Panoramica

IL20RA codifica la subunità alfa del recettore dell’interleuchina‑20 (IL‑20Rα), una subunità recettoriale di citochine di tipo I che eterodimerizza con IL20RB per formare recettori funzionali per IL‑19, IL‑20 e IL‑24. Il legame del ligando attiva la segnalazione JAK/STAT, con una marcata fosforilazione di STAT3 e STAT1, collegando le citochine della famiglia IL‑20 a programmi epiteliali e dei cheratinociti che regolano la funzione di barriera, le risposte antimicrobiche e il rimodellamento tissutale. La segnalazione mediata da IL‑20Rα si intreccia con reti infiammatorie che modellano l’espressione di citochine e chemochine e può influenzare gli stati di proliferazione e differenziazione nei tipi cellulari responsivi. La deregolazione delle vie della famiglia IL‑20 è stata associata a fenotipi infiammatori cutanei e a processi più ampi mediati dal sistema immunitario, rendendo IL20RA un nodo utile per studi meccanicistici della biologia epiteliale guidata dalle citochine.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO IL-20Rα (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene IL20RA in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del IL20RA insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto IL20RA a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina IL-20Rα.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di IL20RA per lo studio della segnalazione di IL-20Rα, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni IL20RA critici per la funzione di IL-20Rα
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di IL20RA per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal IL-20Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal IL-20Rα CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus IL20RA. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal IL-20Rα Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR IL-20Rα (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia IL20RA per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio IL20RA definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.