HSPA14 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-407280

개요

HSPA14(Hsp70 유사 단백질 1)은 HSP70 샤페론 패밀리의 구성원으로, 새로 합성되는 폴리펩타이드를 안정화하고 올바른 접힘을 촉진하며, 세포 스트레스 상황에서 단백질 응집을 제한함으로써 단백질 품질 관리를 지원합니다. 또한 번역, 리보솜-연관 샤페로닝, 그리고 열충격 및 기타 단백질 독성(프로테오톡식) 손상으로부터의 회복을 조율하는 스트레스 반응 경로와 연결된 단백질 항상성(proteostasis) 네트워크에 관여합니다. 접힘 용량과 잘못 접힌 단백질 처리 사이의 균형을 조절함으로써 HSPA14는 산화 스트레스, ER–세포질 단백질 항상성 크로스토크, 적응적 스트레스 신호전달 등의 맥락에서 세포 항상성 형성에 기여합니다. 샤페론 활성의 이상 및 단백질 항상성 불균형은 암 생물학, 신경퇴행, 염증성 스트레스 모델에서 흔히 연구되므로, HSPA14는 스트레스 회복력과 단백질 항상성의 기전을 규명하기 위한 유용한 표적입니다.

HSPA14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 HSPA14 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 HSPA14 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 HSPA14의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HSPA14 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HSPA14 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 HSPA14 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HSPA14 기능에 중요한 HSPA14 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 HSPA14 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HSPA14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 HSPA14 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 HSPA14 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HSPA14 HDR 플라스미드 (h) 및 HSPA14 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 HSPA14 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 HSPA14 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.