Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
HRI Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403442-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HRIO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HRI (h) e o Plasmídeo Double Nickase HRI (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF2AK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HRI Anticorpo (D-12): sc-365239
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HRI Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403442-NIC | 20 µg | $410.00 |
EIF2AK1 codifica o inibidor regulado por heme (HRI), uma quinase de eIF2α sensível ao estresse que fosforila EIF2S1 para modular o início da tradução e a resposta integrada ao estresse (ISR). Em contextos eritroides e não eritroides, a HRI conecta a disponibilidade de heme, o estresse oxidativo e o estresse proteotóxico à atenuação da síntese proteica global, ao mesmo tempo que promove programas transcricionais adaptativos, como a sinalização de ATF4. Essa regulação impacta a proteostase, a homeostase redox e as vias de estresse mitocondrial e citosólico que moldam a sobrevivência celular diante de flutuações de nutrientes e de ferro/heme. A desregulação da sinalização EIF2AK1–eIF2α tem sido investigada no estresse eritropoiético relacionado à anemia, em defeitos de proteostase associados à neurodegeneração e na adaptação de células tumorais ao estresse do microambiente.
HRI O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF2AK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF2AK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF2AK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF2AK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.