hippocalcin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420938

개요

Hpca는 신경세포 칼슘 센서(neuronal calcium sensor) 계열에 속하는 신경성 EF-hand 칼슘 결합 단백질인 히포칼신(hippocalcin)을 암호화하며, Ca2+의 일시적 변동을 시냅스 신호전달과 흥분성 변화로 연결합니다. Ca2+가 결합하면 히포칼신은 구조적 전환을 일으켜 막 결합성을 조절할 수 있고, 그 결과 시냅스 가소성, 활동 의존적 수송(트래피킹), 신경세포의 유전자 발현 프로그램과 같은 과정에 영향을 줍니다. 또한 신경전달물질 수용체 경로 및 하위 키나아제/포스파테이스 연쇄반응과 교차하는 칼슘 의존성 신호 네트워크에 참여하여 장기강화(LTP)와 장기억제(LTD)를 형성하는 데 관여합니다. 신경세포 Ca2+ 항상성의 이상과 칼슘 센서 기능의 변화는 마우스 모델에서 인지적 표현형과 신경퇴행성 또는 신경정신질환 관련 회로 기능장애의 기전을 연구하는 데 중요한 요소입니다.

hippocalcin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Hpca 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Hpca 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Hpca의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 hippocalcin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 hippocalcin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Hpca 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• hippocalcin 기능에 중요한 Hpca 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Hpca 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• hippocalcin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 hippocalcin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Hpca 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  hippocalcin HDR 플라스미드 (m) 및 hippocalcin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Hpca 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Hpca 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.