Glutathione Peroxidase 3/GPX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420664

Visão geral

A glutationa peroxidase 3 (Gpx3/GPX3) é uma selenoenzima secretada que reduz o peróxido de hidrogénio e hidroperóxidos orgânicos utilizando glutationa, contribuindo para a homeostase redox extracelular e limitando os danos oxidativos a proteínas e lípidos. Em tecidos e no plasma de rato, a GPX3 ajuda a amortecer as espécies reativas de oxigénio e interage funcionalmente com o metabolismo da glutationa, redes de defesa antioxidante e sinalização associada à inflamação. Alterações na atividade da GPX3 têm sido associadas na literatura a fenótipos de stress oxidativo e a uma remodelação tecidular desregulada, com efeitos a jusante na função endotelial, ativação de células imunitárias e programas transcricionais sensíveis ao estado redox. Como o tónus de peróxidos extracelulares influencia vias como MAPK e NF-κB, a perturbação de Gpx3 é frequentemente usada para investigar a sinalização regulada por redox e modelos de lesão oxidativa.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Glutathione Peroxidase 3/GPX3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gpx3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gpx3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gpx3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Glutathione Peroxidase 3/GPX3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gpx3 para a investigação da sinalização de Glutathione Peroxidase 3/GPX3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gpx3 críticos para a função Glutathione Peroxidase 3/GPX3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gpx3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Glutathione Peroxidase 3/GPX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Glutathione Peroxidase 3/GPX3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gpx3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Glutathione Peroxidase 3/GPX3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Glutathione Peroxidase 3/GPX3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gpx3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gpx3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.