Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400631

Visão geral

GPX1 codifica a selenoenzima citosólica glutationa peroxidase 1, uma importante proteína de defesa antioxidante que reduz o peróxido de hidrogênio e hidroperóxidos lipídicos utilizando a glutationa como doadora de elétrons. Ao limitar o acúmulo de espécies reativas de oxigênio, a GPX1 ajuda a manter a homeostase redox e influencia redes de sinalização ligadas às respostas ao estresse oxidativo, incluindo programas regulados por NRF2, a função mitocondrial e vias inflamatórias. Alterações na atividade da GPX1 têm sido associadas a mecanismos relevantes para a biologia do câncer, disfunção metabólica, neurodegeneração e patologia cardiovascular, nas quais o desequilíbrio redox pode remodelar fenótipos de sobrevivência celular e de adaptação ao estresse. Por ser uma enzima amplamente expressa, a GPX1 é frequentemente utilizada para investigar como a capacidade antioxidante modula respostas a danos no DNA, a sensibilidade à ferroptose e as respostas celulares à hipóxia ou a sinais inflamatórios.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GPX1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GPX1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GPX1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Glutathione Peroxidase 1/GPX1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GPX1 para a investigação da sinalização de Glutathione Peroxidase 1/GPX1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GPX1 críticos para a função Glutathione Peroxidase 1/GPX1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GPX1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GPX1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Glutathione Peroxidase 1/GPX1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GPX1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GPX1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.