Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Gas6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400978
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gas6 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Gas6, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gas6 Anticorpo (A-9): sc-376087
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gas6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400978 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Growth arrest–specific 6 (GAS6) codifica a Gas6, um ligante secretado dependente de vitamina K para as tirosina-quinases receptoras TAM AXL, MERTK e TYRO3. A sinalização Gas6–TAM regula a eferocitose, a atenuação da imunidade inata, a sobrevivência celular e a migração por meio de vias que comumente incluem PI3K–AKT, MAPK/ERK e NF-κB, com fortes efeitos sobre a polarização de macrófagos e a homeostase endotelial. Em tecidos humanos, a atividade de GAS6 contribui para o crosstalk trombo-inflamatório e pode remodelar interações tumor–imune e o comportamento metastático por meio de programas dependentes de AXL/MERTK. A desregulação da sinalização do eixo GAS6/TAM tem sido associada à progressão do câncer, inflamação crônica, fibrose e patobiologia vascular, tornando-o um alvo frequente em estudos mecanísticos de sinalização do microambiente.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Gas6 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GAS6 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GAS6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GAS6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Gas6.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GAS6 para a investigação da sinalização de Gas6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GAS6 críticos para a função Gas6
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GAS6 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Gas6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Gas6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GAS6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Gas6 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Gas6 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GAS6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GAS6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.