Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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FAM148C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414279
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- FAM148C O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico FAM148C, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:FAM148C Anticorpo (F-10): sc-515089
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
FAM148C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-414279 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
C2CD4C (FAM148C) codifica uma proteína contendo domínio C2, implicada na sinalização dependente de cálcio associada a membranas e na regulação de interações proteína–proteína em membranas intracelulares. Anotações funcionais emergentes associam a FAM148C a vias que coordenam o tráfego vesicular, a dinâmica do citoesqueleto e programas de transcrição responsivos a estímulos que influenciam o crescimento celular e a homeostase metabólica. Estudos genéticos associaram variações no locus C2CD4C a características glicêmicas e ao risco de diabetes tipo 2, apoiando a investigação de seus papéis na função das ilhotas pancreáticas e em redes mais amplas de sinalização endócrina. Essas características tornam a FAM148C um alvo útil para estudos mecanísticos de integração de sinalização e de relações genótipo–fenótipo em modelos de células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO FAM148C (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene C2CD4C em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do C2CD4C, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do C2CD4C na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína FAM148C.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de C2CD4C para a investigação da sinalização de FAM148C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) C2CD4C críticos para a função FAM148C
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos C2CD4C para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo FAM148C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo FAM148C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus C2CD4C. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo FAM148C Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR FAM148C (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia C2CD4C para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo C2CD4C definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.