Eps15 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402303-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Eps15O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Eps15 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Eps15 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EPS15. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Eps15 Anticorpo (E-3): sc-390259
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Eps15 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402303-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Eps15 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402303-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EPS15 codifica o substrato 15 do receptor do fator de crescimento epidérmico (Eps15), um adaptador endocítico que se localiza em fossetas revestidas por clatrina e coordena a internalização de receptores. A Eps15 interage com AP-2, clatrina e parceiros de ligação à ubiquitina para regular a seleção de carga, a formação de vesículas e as decisões de tráfego que moldam a sinalização a jusante. Por meio dessas funções, EPS15 influencia a renovação (turnover) de receptores de fatores de crescimento e a atenuação do sinal em vias endocíticas e dependentes de ubiquitina. A desregulação da endocitose e do tráfego de receptores envolvendo EPS15 tem sido estudada em contextos como sinalização proliferativa alterada e perturbações de programas de transporte vesicular relevantes para a biologia das doenças.
Eps15 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EPS15 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EPS15. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EPS15. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EPS15 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.