ELOVL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407282

Visão geral

ELOVL3 (proteína 3 de elongação de ácidos graxos de cadeia muito longa) é uma elongase localizada no retículo endoplasmático que catalisa a extensão de acil-CoAs de ácidos graxos saturados e monoinsaturados para gerar ácidos graxos de cadeia muito longa usados na biossíntese de lipídios complexos. Por meio de seu papel no alongamento de ácidos graxos, a ELOVL3 contribui para a homeostase lipídica, a composição de membranas e a formação de reservas de sinalização e armazenamento derivadas de lipídios que influenciam o metabolismo celular. A atividade da ELOVL3 está ligada a programas metabólicos de lipídios em tecidos com alta renovação lipídica, e a desregulação das vias de elongação é frequentemente estudada no contexto de desequilíbrio metabólico e estresse celular associado a lipídios. Alterações na composição de ácidos graxos de cadeia muito longa podem afetar a função de organelas e a sinalização inflamatória, tornando a ELOVL3 um ponto relevante para estudos mecanísticos de fenótipos associados ao metabolismo lipídico.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ELOVL3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ELOVL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ELOVL3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ELOVL3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ELOVL3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ELOVL3 para a investigação da sinalização de ELOVL3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ELOVL3 críticos para a função ELOVL3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ELOVL3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ELOVL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ELOVL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ELOVL3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ELOVL3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ELOVL3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ELOVL3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ELOVL3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.