Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EDG-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402843-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EDG-2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EDG-2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EDG-2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para LPAR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EDG-2 Anticorpo (B-10): sc-515665
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EDG-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402843-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EDG-2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402843-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LPAR1 (EDG-2) codifica um recetor acoplado à proteína G para o ácido lisofosfatídico, que se acopla principalmente a Gαi/o, Gαq/11 e Gα12/13 para regular a sinalização Rho/ROCK, o fluxo de cálcio dependente de fosfolipase C e as vias MAPK/ERK e PI3K/AKT. Através destas cascatas, o EDG-2 modula a remodelação do citoesqueleto, a migração celular, a proliferação e a sobrevivência, e influencia a permeabilidade vascular e a sinalização inflamatória. A atividade do LPAR1 integra sinais de mediadores lipídicos na matriz extracelular e no microambiente estromal, moldando a ativação de fibroblastos e o tráfego de células imunitárias. A desregulação da sinalização LPA–LPAR1 tem sido associada à remodelação fibrótica, à invasão de células cancerígenas e a comportamentos ligados à metástase, bem como a processos neuroinflamatórios, tornando-o um alvo frequente para estudos mecanísticos em modelos relevantes de doença.
EDG-2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus LPAR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de LPAR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função LPAR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com LPAR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.