Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dynactin p62 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-426674-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dynactin p62O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Dynactin p62 (m) e o Plasmídeo Double Nickase Dynactin p62 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Dctn4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dynactin p62 Anticorpo (H-4): sc-55603
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dynactin p62 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-426674-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Dynactin p62 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-426674-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene **Dctn4** de camundongo codifica a **dinactina p62**, uma subunidade do complexo dinactina que dá suporte ao transporte citoplasmático mediado pela dineína ao longo dos microtúbulos. A dinactina p62 contribui para a ligação da carga e para a motilidade processiva de complexos dineína–dinactina, influenciando o posicionamento de endossomos e lisossomos, o tráfego vesicular e o manejo de cargas associado à autofagia. Por meio dessas funções, **Dctn4** afeta a homeostase de neurônios e células imunes, nas quais o transporte de longa distância e a distribuição de organelas são críticos. A disfunção de componentes da via dineína–dinactina está amplamente associada a fenótipos neurodegenerativos, alterações na proteostase e sinalização inflamatória, tornando **Dctn4** um ponto útil para estudos mecanísticos de defeitos no transporte baseado em microtúbulos.
Dynactin p62 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Dctn4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Dctn4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Dctn4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Dctn4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.