DHODH CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402983

개요

인간 DHODH(디하이드로오로테이트 탈수소효소)는 미토콘드리아 내막에 존재하는 플라보단백질로, de novo 피리미딘 생합성 과정에서 디하이드로오로테이트를 오로테이트로 산화시키는 속도 제한 단계를 촉매하며, 유비퀴논을 통해 호흡사슬과 연동함으로써 뉴클레오타이드 생산을 연결합니다. DHODH는 UMP의 가용성을 조절함으로써 DNA/RNA 합성, 세포주기 진행, 그리고 증식 스트레스 상황에서의 대사 적응을 뒷받침합니다. DHODH 활성의 교란은 뉴클레오타이드 풀, 복제 역학, 미토콘드리아의 산화환원 균형을 재편하여, 유전체 유지와 세포 생물에너지 조절에 관여하는 경로들과의 연관성을 보여줍니다. 피리미딘 대사의 이상과 DHODH 의존성은 암세포 증식 및 면역세포 활성화 등 여러 질환 관련 맥락에서 관찰되어 왔습니다.

DHODH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DHODH 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DHODH 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DHODH의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 DHODH 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 DHODH 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DHODH 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• DHODH 기능에 중요한 DHODH 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DHODH 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• DHODH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 DHODH CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DHODH 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  DHODH HDR 플라스미드 (h) 및 DHODH HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DHODH 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DHODH 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.