cytochrome c1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404958-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cytochrome c1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase cytochrome c1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase cytochrome c1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CYC1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cytochrome c1 Anticorpo (A-5): sc-514435
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cytochrome c1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404958-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cytochrome c1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404958-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano CYC1 codifica o citocromo c1, uma subunidade essencial do complexo III mitocondrial (complexo citocromo bc1) que transfere elétrons do ubiquinol para o citocromo c na membrana interna da mitocôndria. Essa atividade sustenta a fosforilação oxidativa ao contribuir para a translocação de prótons, ajudando a estabelecer o gradiente eletroquímico usado na síntese de ATP. A perturbação de componentes do complexo III pode alterar o equilíbrio redox mitocondrial e a produção de espécies reativas de oxigênio, conectando a biologia de CYC1 a vias que regulam o metabolismo energético celular e respostas ao estresse. A respiração mitocondrial desregulada e a integridade da cadeia de transporte de elétrons são frequentemente estudadas no contexto de remodelação metabólica e disfunção mitocondrial associada à neurodegeneração.
cytochrome c1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CYC1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CYC1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CYC1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CYC1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.