Clathrin Light Chain B/CLTB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404228

Visão geral

CLTB codifica a cadeia leve B da clatrina, uma subunidade regulatória do tríscelo de clatrina que modula a montagem do revestimento, a dinâmica da malha e as interações com adaptadores durante a endocitose mediada por clatrina. Por meio do seu papel na formação de vesículas na membrana plasmática e na rede trans-Golgi, a CLTB sustenta a internalização de receptores, a reciclagem de vesículas sinápticas e a triagem de proteínas de membrana que influenciam a sinalização a jusante e a captação de nutrientes. O tráfego dependente de CLTB interage com a reciclagem endossomal e o encaminhamento lisossomal, moldando o tempo de permanência dos receptores e a sensibilidade das vias. A desregulação da função do revestimento de clatrina e do fluxo endocítico é frequentemente associada a alterações na transdução de sinais e em fenótipos de proteostase estudados em biologia do câncer e em modelos de neurodegeneração.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Clathrin Light Chain B/CLTB (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CLTB em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CLTB, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CLTB na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Clathrin Light Chain B/CLTB.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CLTB para a investigação da sinalização de Clathrin Light Chain B/CLTB, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CLTB críticos para a função Clathrin Light Chain B/CLTB
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CLTB para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Clathrin Light Chain B/CLTB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Clathrin Light Chain B/CLTB Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CLTB. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Clathrin Light Chain B/CLTB Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Clathrin Light Chain B/CLTB (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CLTB para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CLTB definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.