CKR-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419702
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CKR-9 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CKR-9, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CKR-9 Anticorpo (CW-2.2.1): sc-47722
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CKR-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419702 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Ccr9 codifica o CKR-9 (CCR9), um receptor de quimiocinas acoplado à proteína G mais conhecido por se ligar à CCL25 e direcionar o tráfego quimiotático de linfócitos. Em camundongos, o CCR9 contribui para o desenvolvimento de timócitos e para programas de homing intestinal ao modular sinais migratórios, adesão dependente de integrinas e o posicionamento em microambientes teciduais. A sinalização do CKR-9 se integra a vias canônicas de GPCR, incluindo fluxo de cálcio e cascatas MAPK/PI3K, que influenciam o estado de ativação, a sobrevivência e a motilidade de células imunes. A atividade desregulada do eixo CCR9–CCL25 tem sido implicada em processos inflamatórios em sítios mucosos e em mecanismos que sustentam uma localização aberrante de leucócitos, relevante para patologias mediadas pelo sistema imune.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CKR-9 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ccr9 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ccr9, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ccr9 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CKR-9.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ccr9 para a investigação da sinalização de CKR-9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ccr9 críticos para a função CKR-9
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ccr9 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CKR-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CKR-9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ccr9. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CKR-9 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CKR-9 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ccr9 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ccr9 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.