CKR-2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419705

개요

Ccr2는 케모카인 수용체 CKR-2(CCR2)를 암호화하며, CKR-2는 CCL2/MCP-1 및 관련 리간드에 결합해 단핵구와 기타 골수계 세포 아형의 화학주성을 유도하는 7회 막관통 GPCR입니다. 리간드가 결합하면 CKR-2는 Gαi 의존적 경로를 통해 PI3K/AKT 및 MAPK 연쇄반응, 칼슘 유입, 인테그린 활성화, 세포골격 재구성을 조절하여 백혈구 이동과 염증성 분극을 형성합니다. 마우스에서 Ccr2 활성은 조직 손상 및 감염 부위로 염증성 단핵구를 유입시키는 데 핵심적이며, 다양한 염증성 미세환경에서 대식세포 축적에도 영향을 줍니다. CCR2 축 신호전달의 이상은 면역세포 침윤과 사이토카인 네트워크를 촉진하는 요인으로서 만성 염증, 신경염증, 종양 관련 골수계 생물학 분야에서 자주 연구됩니다.

CKR-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ccr2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ccr2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ccr2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CKR-2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CKR-2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ccr2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CKR-2 기능에 중요한 Ccr2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ccr2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CKR-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CKR-2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ccr2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CKR-2 HDR 플라스미드 (m) 및 CKR-2 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ccr2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ccr2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.