CH25H CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419641

개요

Ch25h는 콜레스테롤 25-하이드록실레이스(CH25H)를 암호화하며, CH25H는 소포체에 연관된 효소로 콜레스테롤을 25-하이드록시콜레스테롤로 전환합니다. 25-하이드록시콜레스테롤은 막 지질 조성과 콜레스테롤 항상성의 전사적 조절을 조절하는 옥시스테롤입니다. CH25H는 SREBP 신호전달과 같은 스테롤 조절 프로그램 및 옥시스테롤 반응성 핵 수용체와의 상호작용을 통해 지질 대사, 선천면역 신호, 염증성 유전자 발현에 영향을 미칩니다. 마우스 모델에서 Ch25h 활성은 대식세포 활성화 상태, 항바이러스 제한 경로, 사이토카인 네트워크 조절과 연관되어 왔습니다. 옥시스테롤 생성의 이상 조절은 대사성 염증과 면역 매개 조직 리모델링 연구에서 중요한데, 콜레스테롤 처리(핸들링)의 변화가 세포 스트레스 반응과 신호 출력에 영향을 줄 수 있기 때문입니다.

CH25H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ch25h 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ch25h 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ch25h의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CH25H 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CH25H 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ch25h 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CH25H 기능에 중요한 Ch25h 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ch25h 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CH25H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CH25H CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ch25h 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CH25H HDR 플라스미드 (m) 및 CH25H HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ch25h 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ch25h 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.