Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD52 (h): sc-403151
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD52 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD52, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD52 Antibody (HI186): sc-51560
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD52 (h) | sc-403151 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
CD52 est une glycoprotéine de surface ancrée au glycosylphosphatidylinositol (GPI), fortement exprimée sur les lymphocytes matures, où elle contribue à l’organisation de la membrane et à la signalisation des cellules immunitaires au sein des radeaux lipidiques. Bien qu’elle possède un court cœur peptidique, CD52 présente une glycosylation dense pouvant influencer l’agrégation des récepteurs, les interactions cellule–cellule et la réactivité aux signaux d’activation dans les lignées hématopoïétiques. L’expression de CD52 est étroitement liée à la différenciation des lymphocytes et à l’homéostasie immunitaire, ce qui en fait un marqueur utile dans l’étude des états des cellules immunitaires et de la biologie des leucocytes. Une expression dérégulée de CD52, ainsi que des associations avec le contexte immunitaire, ont été rapportées dans divers cancers hématologiques et situations inflammatoires, ce qui souligne sa pertinence pour des investigations mécanistiques de la régulation immunitaire.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD52 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène CD52 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du CD52, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert CD52 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD52.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en CD52 pour l'étude de la signalisation de CD52, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de CD52 essentiels à la fonction de CD52
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de CD52 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD52 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le CD52 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus CD52. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD52 plasmide HDR (h) et le CD52 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie CD52 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles CD52 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.